ИСТИНА

Научно-исследовательские работы по государственному контракту в 2000 г. выполнялись по трем основным направлениям: 1.Ферменты и биокаталитические технологии для целей промышленности и сельского хозяйства; 2. Анализ и сенсорные технологии; 3. Медицинские препараты на основе ферментов и их регуляторов. В рамках первого направления "Ферменты и биокаталитические технологии для целей промышленности и сельского хозяйства" были изучены возможности ферментативного синтеза ампициллина в гомогенной водной среде и в промышленно важных условиях гетерогенной системы «водный раствор-осадок». Показано, что стабильность двух потенциальных катализаторов такого процесса – пенициллинацилаз из E.coli и из A.faecalis как в водных растворах, так и гетерогенных системах «водный раствор-осадок» достаточно высока для создания эффективного биокаталитического процесса. Выявлен один из ключевых факторов эффективности ферментативного синтеза, связанный с относительной реакционной способностью (нуклеофильностью) 6-аминопенициллановой кислоты, и исследована его зависимость от различных свойств системы. Получены высокоактивные штаммы-продуценты карбогидраз Penicillium funiculosum, оптимизирован процесс получения ферментов с повышением в 6-8 раз активности основных компонентов ферментного комплекса , наработана опытная партия ферментного препарата для последующих испытаний. Проведены иcпытания действия препаратов пектиназы, гемицеллюлазы и целлюлазы на иммунологический статус растений. Установлено снижение повреждающего действия инфекции Sclerotinia libertiana (возбудитель белой гнили). под влиянием ферментных препаратов, понижение проницаемости мембран клеток инфицированной ткани, стимуляция ее защитных реакций. Применение пектолитических ферментов является перспективным для целей целлюлозобумажной промышленности. Показано, что пектиназы способствуют проникновению ферментов вглубь волокон материала, ксиланазы и маннаназы разрушают связи между полисахаридами и лигнином, целлюлазы превращают плотную макулатуру (картон) в жидкую массу, пригодную для получения целлюлозы. В рамках направления "Анализ и сенсорные технологии" были получены следующие результаты: Для широко используемых пестицидов – 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4-Д), 2-метил-4-хлорфеноксиуксусной кислоты (2-М-4-Х), 2,4,5-трихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4,5-Т), атразина, пропазина, симазина, хлорсульфурона разработаны и апробированы новые экспрессные иммуноаналитические тест-системы для выявления антигенов в пробах воды. Пределы обнаружения пестицидов (2,4-Д, симазин, атразин, тербутилазин) и антибиотика хлорамфеникола методом мембранного ИФА существенно ниже предельно допустимой концентрации для данных пестицидов в питьевой воде. Разработана конструкция и изготовлен опытный образец иммуносенсорного датчика на основе мембранного микрочипа с иммобилизованным антигеном, который успешно применен для анализа пестицида атразина. Разработан лабораторный метод экспрессного и непрерывного количественного определения ненасыщенных жирных кислот в свободном состоянии и в составе жиров и растительных масел с помощью биферментной системы «липаза/липоксигеназа» в среде обращенных мицелл. Метод отличается простотой приготовления системы и легкостью в эксплуатации. Для определения общего загрязнения окружающей среды методом биологического потребления кислорода (БПК) и анализа фенольных соединений в сточных водах промышленных предприятий разработан портативный электрохимический экспресс-анализатор, состоящий из микропотенциостата, электрохимической ячейки и кислородного электрода. К наиболее значимым результатам работ по направлению "Медицинские препараты на основе ферментов и их регуляторов" можно отнести следующие: Разработан обратимо ацилированный по активному центру препарат урокиназы, который в системе плазменный сгусток/плазма крови человека in vitro, медленно реактивируясь, вызывает значительно более длительный (после лаг-фазы) тромболизис, чем свободная урокиназа, при существенно меньших уровнях побочных эффектов на белки плазмы. Найдена оптимальная комбинация ацил-урокиназы с низкой дозой свободной урокиназы, вызывающая столь же пролонгированный и глубокий тромболизис, что и индивидуальная ацил-урокиназа, но без лаг-фазы с сохранением низкого уровня побочных эффектов. Разработаны методы микрокапсулирования лекарственных белков на примере ингибиторов протеиназ и их ингибиторов для перорального, интраназального и пульмонарного применения. Биодеградируемые микросферы разных размеров могут быть получены из природных (белки, полисахариды, оболочки вирусов и живых клеток) и синтетических (полимолочная кислота, сополимер полилактид-гликолид, поли *-капролактон и др.) материалов. Разработаны способы получения микросфер для регуляции скорости высвобождения лекарственного белка. Впервые получен перевязочный материал, сочетающий пролонгированное некролитическое действие с чрезвычайно высокой способностью к набуханию в водных средах. Показана эффективность использования разработанного материала для лечения ран сложной этиологии у онкологических больных.