Аннотация:У шпорцевой лягушки первичные половые клетки (ППК) образуются из цитоплазматического материала специализированной области вегетативного полюса ооцита, которая называется половая плазма (ПП). В зрелом ооците Xenopus половая плазма организована в виде многочисленных мелких островков. Каждый из этих островков содержит митохондрии, эндоплазматический ретикулюм, гранулярно-фибриллярный матрикс, мРНК и белки. Именно эти мРНК и белки ПП позже во время раннего развития регулируют правильное формирование и миграцию ППК. Одной из таких мРНК является germes. Нами показано, что germes - компонент половой плазмы и ранний маркер первичных половых клеток. мРНК germes начинает экспрессироваться с самых ранних этапов оогенеза (ст I). К стадии III ооцитарного роста РНК заякоревается в вегетативном кортексе ооцитов вместе с некоторыми другими маркерами ПП. Затем, начиная с первых суток развития, содержание транскрипта в эмбрионах постепенно падает. На стадии средней нейрулы материнский транскрипт уже не детектируется.С помощью кроличьих поликлональных антител к Germes мы исследовали наличие и локализацию белка в яичниках, а также раннем развитии шпорцевой лягушки. Белок Germes обнаружен в ранних ооцитах (I‒II стадии) и сохраняется во время роста. Далее белок присутствует в ранних стадиях развития до стадии нейрулы, а после наблюдается плавное снижение количества белка Germes в зародышах вплоть до последней изученной нами стадии 48, однако он не исчезает полностью. Во время ооцитарного роста белок, как и РНК-транскрипт, на I-II стадии имеет диффузное распределение, затем локализуется в островки ПП к III стадии. В ооцитах поздних стадий белок также детектируется в вегетативном кортексе в составе ПП. На ранних этапах эмбрионального развития количество белка сохраняется, а затем, по-видимому, белок Germes сохраняется только в ППК, где он выявляется с помощью ИГХ анализа.В ходе изучения локализации белка в оогенезе, мы установили, что белок содержится не только в ооцитах всех стадий, но и в фолликулярных клетках (ФК). Дальнейшее изучение экспрессии germes в тонком фолликулярном слое показало, что относительное количество мРНК germes в ооцитах V-VI стадий и ФК сопоставимо. А содержание транскрипта в ФК малых ооцитов превышает количество в самих ооцитах. В ФК мРНК обнаруживается как в цитоплазме, так и в ядре больших и малых фолликулов. ФК образуются из эпителиального компартмента формирующегося яичника лягушки, т.е. имеют соматическое происхождение. Наличие мРНК и белка гена-маркера половой линии germes в соматических фолликулярных клетках показано впервые. Можно предположить, что это является результатом транспорта из ооцита. Доказательством экспрессии germes в ФК является обнаружение нами непроцессированной формы мРНК на протяжении всего оогенеза.
