Результаты этапа: Пероксидазы растений, участвующие во многих жизненно важных реакциях, кодируются десятками паралогичных генов. Так, в геномах A. thaliana и риса обнаружено 73 и 138 пероксидазных гена, соответственно, распределенных по всем хромосомам. Такое количество генов свидетельствует о важности выполняемой ими функции, однако, несмотря на активные исследования растительных пероксидаз, информация о функциях конкретных генов пероксидаз остается ограниченной.
Изучение генов пероксидаз имеет большое практическое значение, т.к. пероксидазы, в первую очередь, пероксидаза хрена (ПХ), являются наиболее востребованными маркерами в иммуноферментном анализе. Несмотря на огромную потребность в данном ферменте, существует проблема поиска аналогичного фермента с более высокой стабильностью и повышенной каталитической способностью. Именно поэтому в настоящее время продолжается поиск аналогов ПХ и кодирующих генов пероксидаз из других растений, разрабатываются методы их экспрессии в различных векторных системах. Одним из таких генов является, ген A. thaliana AtРrx53/PXD, а также, предположительно, ген высокостабильной анионной пероксидазы пальмы Trachycarpus fortunei. Отметим, что гомолог гена Atprx53 (уровень гомологии 93% по белку) хорошо исследован у хрена (Armoracia rusticana), и анионная пероксидаза хрена HRPA2 является одной из основных изоформ пероксидазы хрена.
Гомологи пероксидаз HRPA2 и Atprx53 обнаружены у Brassica napus, Populus trichocarpa и Populus alba.
Исследования по теме проекта позволят получить новую информацию о структуре, функции и эволюции генов пероксидаз, а также предложить способы направленного генетического изменения генов пероксидаз (путем получения рекомбинантных форм и мутагенеза in vitro) для эффективной гетерологичной экспрессии. |