ИСТИНА

В проекте планируется решить следующие задачи. Задача 1. Ранее нами была детально исследована аберрантная экспрессия рековерина в опухолях легких [Bazhin A.V. et al. Lung Cancer. 2001;34:99-104; Savchenko M.S. et al. Lung Cancer. 2003;41:363-7; Bazhin A.V. et al. Lung Cancer. 2004;44:193-8]. Позднее была впервые обнаружена аберрантная экспрессия фоторецепторных белков в тканях кожной меланомы [Bazhin A.V. et al. Cancer Immunol. Immunother. 2007;56:110-6; Bazhin A.V. et al. Int. J. Cancer. 2007;120:1268-76; Bazhin A.V. et al. Int. J. Cancer. 2009;124:140-9] и тканях аденокарциномы поджелудочной железы [Karakhanova S. et. al. Pancreas. 2014; 43:784-94]. Недавно нами было начато исследование аберрантной экспрессии рековерина в клетках ретинобластомы. В настоящее время завершается изучение экспрессии рековерина в опухолях почки. В предлагаемом проекте планируется провести исследование ранее неизученной аберрантной экспрессии рековерина в опухолях надпочечников. Актуальность выбранного объекта обусловлена трудностью гистохимического различения доброкачественных и злокачественных опухолей надпочечников. Задача 2. В норме рековерин локализован преимущественно в клетках сетчатки, где он взаимодействует с фоторецепторными мембранами с помощью миристоильного остатка. Поскольку субклеточная локализация рековерина в опухолевых клетках оставалась неизвестной, недавно нами была проведено электронно-микроскопическое исследование внутриклеточной локализации рековерина в клетках ретинобластомы Y79. При этом не удалось установить, связан ли рековерин с какими-то клеточными структурами. В связи с этим возник вопрос о наличии/отсутствии миристоильного остатка в структуре рековерина в клетках ретинобластомы Y79. Для ответа на этот вопрос будет выполнен масс-спектроскопический анализ рековерин-содержащего экстракта указанных опухолевых клеток с использованием миристоилированного и немиристоилированного препаратов рековерина в качестве маркеров. Задача 3. Ранее мы продемонстрировали функциональную значимость для опухолевых клеток таких фоторецепторных белков, как трансдуцин и cGMP-фосфодиэстераза 6 [Bazhin A.V. et al. Cell. Mol. Life Sci. 2010;67:817-28]. Однако вопрос о функциональной значимости рековерина для трансформированных клеток все еще остается открытым. В этой связи нами планируется с использованием метода РНК-интерференции получить стабильную клеточную линию ретинобластомы Y79 с пониженной экспрессией (нокдауном) гена рековерина.