Почвенные микробиомы: геномное разнообразие, функциональная активность, география и биотехнологический потенциалНИР

Soil microbiomes: genomic diversity, functional activity, geography and biotechnological potential

Источник финансирования НИР

госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию)

Этапы НИР

# Сроки Название
1 1 января 2021 г.-31 декабря 2021 г. Исследование почвенных микробных сообществ аридных и тропических экосистем, оценка их физиологического состояния и функциональной активности.
Результаты этапа: В исследованных образцах аридных почв и пород установлена общая численность прокариотных клеток на уровне 10^7 – 10^8 клеток/г, из которых до 6.7% способны переходить в метаболически активное состояние in situ после увлажнения и до 5% культивируются на питательных средах. Структура сообществ культивируемых бактерий исследованных образцов крио-аридных и жарких аридных почв и пород была сходна на уровне филумов (Actinobacteria, Proteobacteria, Firmicutes), в то же время, отмечены существенные различия на родовом уровне. Наиболее разнообразные в таксономическом и функциональном отношении бактериальные сообщества выявлены в мерзлых породах Северного острова архипелага Новая Земля и поверхностном горизонте почвы пустыни Мохаве. В ходе работы составлена коллекция из 430 культур представителей 59 родов аэробных гетеротрофных бактерий, в том числе 11 штаммов ранее не описанных видов. Выявлены штаммы бактерий (33 штамма) проявляющие наибольшую толерантность к температурам, рН среды и присутствию водорастворимых солей, для 13 штаммов показана множественная антибиотикоустойчивость. Установлено, что актиномицеты являются неотъемлемым компонентом всех микробных комплексов заповедных зон Вьетнама. Высокие показатели численности и длины актиномицетного мицелия и доминирование стрептомицетов в сапротрофном бактериальном комплексе свидетельствуют о важной роли данных микроорганизмов в деструкции органического вещества в исследуемых субстратах. Общая численность актиномицетов в исследованных образцах почвы и растительного опада достигала до 10^8 КОЕ/г почвы, длина актиномицетного мицелия до 1000 м, что на 2 порядка выше, чем в других почвах с низкими значениями рН. В структуре актиномицетного комплекса всех изученных субстратов доминировал род Streptomyces. Составлена коллекция из 80 штаммов актиномицетов, выделенных из почв и опада заповедных зон Вьетнама, 12 штаммов показали высокую антибиотическую активность по отношению к тест-культурам.
2 1 января 2022 г.-31 декабря 2022 г. Метагеномный анализ нефтезагрязненных почв, научные основы ремедиации почв от нефти и нефтепродуктов.
Результаты этапа: Проведено исследование влияния разливов нефти и нефтепродуктов на активность и структуру микробных сообществ в почвах разных биоклиматических зон России. В загрязненных почвах выявлено снижение микробного разнообразия и смена метаболически активных представителей доменов Bacteria и Archaea, по сравнению с контрольными образцами. В присутствии нефти отмечено формирование специфического комплекса бактерий с доминантами определенных родов автохтонной микрофлоры, различающихся в зависимости от типа почв. Для образцов нефтезагрязненных почв южных широт доминирующая роль в структуре микробного комплекса принадлежала представителям актинобактерий, для почв центральной и северной широт – протеобактериям. В почвах, загрязнённых нефтью, на фоне снижения биомассы метаболически активных прокариот наблюдалось увеличение содержания функциональных генов (xylE, alkB, bssA), маркирующих начальный этап деградации углеводородов. Показано, что внесение в загрязненную торфяную почву полного минерального удобрения (N40P50K50) на фоне известкования (1/2 гидролитической кислотности) приводит к возрастанию более чем в 2 раза биомассы клеток прокариот, числа копий функциональных генов (bssА и nifH), что сопровождается значительным снижением концентрации нефти в почве. Также установлено, что внесение хитина в нефтезагрязненную почву на порядок увеличивает численность метаболически активного микробного сообщества, способствует оструктуриванию почвы и уменьшает содержание нефтепродуктов. В ходе проведенного исследования собрана коллекция штаммов прокариот - деструкторов углеводородов, представляющих интерес для использования в технологиях ремедиации почв от нефтепродуктов. Исследование собранной коллекции в настоящее время продолжается.
3 1 января 2023 г.-31 декабря 2023 г. Микробное население городских почв: особенности формирования и функции.
Результаты этапа: Проведенные исследования урбаноземов и конструктоземов в различных городах Европейской территории РФ (Краснодара, Майкопа, Москва, Ростов-на-Дону, Сочи, Симферополя, Сыктывкар) показали, что микробиологические показатели в городских почвах в значительной степени изменяются в зависимости от типа и интенсивности антропогенного влияния, а также воздействия факторов окружающей среды. Общий список видов дрожжевых грибов, обнаруженных нами в городских почвах, подтверждает высокое таксономическое разнообразие почвенных дрожжевых сообществ. Разнообразие дрожжевых грибов почв г. Москвы выше, чем в ненарушенных зональных почвах Европейской территории России. Пигментированные дрожжи являются четким биоиндикатором загрязнения городской почвы. Показано отсутствие типичных для природных экосистем педобионтных видов дрожжей из родов Saitozyma и Solicoccozyma в зоне максимального автотранспортного загрязнения, а также в зоне теплового загрязнения (район теплотрасс). Значимым показателем при использование почвенных дрожжевых грибов в биоиндикации городских почв также можно считать критерий присутствия клинически значимых аскомицетовых видов дрожжевых грибов рода Candida. Впервые проведено комплексное исследование структуры сапротрофного бактериального комплекса городских почв одновременно с оценкой санитарно-микробиологического состояния. Показано, что в урбаноземах на территории некоторых южных крупнейших (г. Краснодар) и крупных (г. Симферополь, г. Сочи) городов происходит трансформация бактериального комплекса в сторону увеличения представленности семейства Enterobacteriaceae по сравнению с городскими фоновыми и зональными фоновыми почвами. Чем интенсивнее антропогенное воздействие (высокая численность населения, туристическая нагрузка, близость прибрежной полосы), тем сильнее выражено изменение в структуре комплекса. В городских почвах, находящихся под влиянием сильной антропогенной нагрузки, может происходить нарушение такой важной экологической функции почвы как «бактериальный фильтр», что может представлять определенную опасность для здоровья населения. Общая численность бактерий в исследованных образцах твердых атмосферных выпадений (ТАВ) городов Европейской части России (Москва, Сыктывкар, Ростов-на-Дону, Краснодар) составляли от 1.0 до 4,7 млрд. клеток /г, что было ниже численности бактерий в образцах урбаноземов. Численность сапротрофных культивируемых бактерий в образцах ТАВ варьировала от 2,5 до 46,8 млн. КОЕ /г и была в несколько раз ниже, чем в почве (от 10,2 до 31,5 млн. КОЕ/г). Среди сапротрофных культивируемых бактерий в образцах ТАВ доминировал род Micrococcus, иногда к нему присоединялись роды Arthrobacter и Streptomyces, в почвах доминировали представители других родов бактерий. Максимальное видовое разнообразие бактерий семейства Enterobacteriaceae было зафиксировано в образцах ТАВ, отобранных на участках с повышенной антропогенной и транспортной нагрузкой (Хамовники и ТТК). Санитарно-показательный микроорганизм Escherichia coli обнаружен во всех образцах ТАВ и почвы г. Москвы, его содержание варьировало от 10 до 100 КОЕ/г, что по оценке степени эпидемической опасности позволяет отнести их к умеренно опасным. Впервые представлена комплексная (количественная и качественная) характеристика прокариотных сообществ твердых атмосферных выпадений (пылеаэрозоля) и городских почв (урбаноземов и реплантозема) на территории г. Москвы на участках с разной интенсивностью антропогенной нагрузки. Среди культивируемых бактерий в пылеаэрозолях доминировали представители рода Micrococcus, в то время как в почвах – представители филума Proteobacteria. В образцах твердых атмосферных выпадений обнаружены представители семейства Enterobacteriaceae (бактерии родов Escherichia, Klebsiella, Enterobacter и Citrobacter), среди которых имеются виды, потенциально патогенные для человека. Максимальное видовое разнообразие бактерий семейства Enterobacteriaceae зафиксировано в образцах ТАВ, отобранных на участках с повышенной транспортной нагрузкой и в центральных районах города. На основании значений экологических индексов, рассчитанных для прокариотных сообществ in situ (баркодинг гена 16S рРНК), можно сделать вывод, что сообщества пылеаэрозолей характеризуется более низким таксономическим разнообразием по сравнению с сообществами близко расположенных урбаноземов и реплантозема. Очевидно, что на формирование прокариотных сообществ пылеаэрозолей оказывает значительное влияние индивидуальная устойчивость микроорганизмов к факторам среды, процессы пылепереноса, а также степень антропогенной нагрузки. Бактериофаги были обнаружены во всех исследованных образцах верхних горизонтов почв (урбанозем и природные почвы). Численность бактериофагов, подсчитанная с помощью красителя SYBR Green I, достигала значительных величин (0,34–5,7 млрд в 1 г почвы) и была сравнима с их численностью в донных отложениях. Численность фагов большинства исследованных почв была несколько ниже численности бактерий. При помощи просвечивающей электронной микроскопии выявлено присутствие следующих морфотипов: икосаэдрические, хвостатые и нитчатые бактериофаги. Присутствовали следующие морфотипы: икосаэдрические, хвостатые и нитчатые бактериофаги. Модельный опыт с внесением концентрированных фаговых суспензий приводило к изменению численности бактериальной популяции. Обнаружено, что содержание биомассы грибных спор и водорослей выше в пыли, чем в верхнем горизонте почвы, и не зависит от природных условий расположения города, но определяется локальными условиями функционального использования территории. Массовая доля грибной и водорослевой биомассы в составе придорожной пыли выше в 1,5–6 раз, чем в пыли рекреационных участков и составляет сотые доли процента от всей массы пыли. Разнообразие, численность и видовая структура комплексов культивируемых грибов в пыли и почве городов различаются. В пыли выявлено более высокое видовое богатство культивируемых микромицетов, чем в поверхностных горизонтах городских почв. Разнообразие грибов может быть несколько выше в пыли на придорожной территории по сравнению с парковой. Наибольшее видовое богатство культивируемых микромицетов выявлено в пыли Сыктывкара и Сочи, наименьшее – в Москве и Краснодаре. Наибольшее видовое разнообразие водорослей выявлено в пыли Москвы и Сочи, наименьшее - в Сыктывкаре. Показано, что на уровень присутствия на таксономический состав грибов и водорослей в городских почвах и пыли оказывают влияние как природно-климатические факторы, так и интенсивность и характер человеческого воздействия на среду обитания; при этом существует существенное отличие грибных комплексов твердых атмосферных выпадений (седиментов) и почв, что говорит о существовании в городской среде самостоятельного пула микроорганизмов пыли. Проведенный мониторинг измененеия микробного населения конструктоземов (Краснодара, Майкопа, Москва, Сочи, Симферополя, Сыктывкар) выявил, что в течение первого года с момента их создания таксономическое разнообразие и функциональная активность грибного пула существенно выше, чем в окружающих урбаноземах. Спустя год в конструктоземах таксономическое разнообразие грибов возрастает, изменяется характер распределения численности разных трофических групп, метаболическая активность грибного пула, происходит переориентация сообществ на новые субстраты. Скорости протекания грибных сукцессий конструктозёмов различны в городах разных природных зон. В северных регионах изменение микобиоты происходит медленнее, и, спустя год, сообщество сохраняет основные свойства от исходного, интродуциремого в процессе конструирования. В южных регионах сообщество трансформируется быстрее, спустя год приобретая сходные черты, характерные для почвенной микобиоты конкретного города. При сравнении метаболической активности грибов верхних слоев конструктоземов в момент закладки и через год показано, что в слоистых активность грибного пула выросла по сравнению с исходной, а в смешанных она осталась на том же уровне или слегка уменьшилась, но изменилась интенсивность потребления некоторых субстратов.
4 1 января 2024 г.-31 декабря 2024 г. Исследование функциональной активности (участие в продукции БАВ и разложении полимеров, роль в процессах почвообразования) микробного комплекса, ассоциированного с почвенной мезофауной.
Результаты этапа: Показано, что в муравейниках и муравьях присутствует большее разнообразие бактерий и актиномицетов, чем в контрольной почве. Активность процессов азотфиксации, денитрификации и метаногенеза выше в большинстве исследованных муравейников. В среднем, содержание биофильных элементов в муравейнике выше, чем в контрольной почве, при этом, характер накопления и распредления биофильных элементов различен в гнездах разных видов муравьев. Распределение биофильных элементов и активностей биологических процессов в муравейниках, и в контрольной почве вертикально стратифицировано. Из муравьев Lasius niger, Messor structor и Formica rufa методом посева выделена коллекция мицелиальных представителей филума Actinomycetota, роды Streptomyces, Pseudonocardia, Tsukamurella, Actinomadura и Nocardia, обладающих антибактериальной активностью. Муравьи L.niger являются местообитанием мицелиальных организмов: на одну рабочую особь приходится, в среднем, 100 КОЕ микромицетов, что в пересчёте на 1 г живых особей составляет 25 тыс. КОЕ/г. Количество микромицетов в материале гнезд в 3 раза превышает численность в окружающей почве. Cостав сообществ микромицетов может существенно различаться в муравьях, материале их гнезд и окружающей почве. Максимальное разнообразие микромицетов выявлено в материале гнезда. Среди отобранных в коллекцию 117 штаммов микромицетов антагонистическая активность к тест культурам бактерий выявлена у 50 (43%) штаммов. При этом установлено, что наиболее активными являются штаммы, выделенные из самих муравьев. Оценено таксономическое разнообразие дрожжей, ассоциированных с семью видами муравьев (Formica cunicularia, Lasius flavus, L. fuliginosus, L. niger, L. umbratus, Polyergus rufescens, Tetramorium caespitum). Во всех видах муравьев, за исключением L. niger, нами были обнаружены дрожжи, всего было обнаружено 17 видов дрожжей. Численность дрожжевого населения колебалась в пределах от 2 до 4×10 тыс. КОЕ/особь. Дрожжевое население муравьев достоверно зависит от вида насекомого, причем у экологических близких видов муравьев и структура дрожжевого населения проявляет сходные черты. Географическое положение мест пробоотбора также может существенно влиять на состав ассоциированных с муравьями дрожжевых грибов. Исследовано дрожжевое население 15 видов тропических диплопод из отрядов Polydesmida, Spirobolida, Glomerida, Spirostreptida, Sphaerotheriida, Platydesmida. Дрожжи были обнаружены во всех проанализированных видах тропических диплопод. Однако в субстрате, в которым предположительно питаются многоножки, численность дрожжей оказалась в среднем на 2-3 порядка выше. В ходе исследования выявлено 78 видов дрожжей, среди которых 18 видов являются ранее не описанными. Структура сообщества дрожжевого населения, ассоциированного с диплоподами, меняется в ряду: покровы – кишечник – экскременты, происходит перестройка дрожжевых сообществ, в частности, возрастает доля аскомицетов. Проведено исследование антимикробной активности бактерий, выделенных из пищеварительного тракта двух географически, трофически и систематически контрастных групп почвенных животных: сапрофагов - тропических многоножек Nedyopus dawydoffiae и Orthomorpha sp., и фитофагов умеренной зоны - колорадских жуков Leptinotarsa decemlineata (имаго и личинки). Из кишечника многоножек и их пищевого субстрата выделено и идентифицировано 25 родов бактерий. Из кишечника колорадских жуков и их личинок впервые были обнаружены 12 видов: Micromonospora phytophila, Neobacillus drentensis, Pseudomonas gessardii, P. poae, P. rhizosphaerae, Pantoea agglomerans, Streptomyces chartreusis, S. clavifer, S. microflavus, S. rishiriensis, S. badius и S. coelicoflavus. Впервые описана антимикробная активность у ряда обнаруженных видов прокариот. Были выявлены наиболее перспективные для химического изучения образуемых антибиотиков штаммы бактерий, проявившие активность в отношении патогенов Staphylococcus aureus, Leuconostoc mesenteroides, L. mesenteroides, Pseudomonas aeruginosa и Mycobacterium smegmatis. Проведено сравнение спектров антимикробной активности бактерий, ассоциированных с почвенными беспозвоночными животными разных трофических групп: сапрофагами (Cylindroiulus caeruleocinctus и Armadillidium vulgare), фитофагами (Leptinotarsa decemlineata и Gastrophysa viridula), хищниками (Lithobius forficatus), с целью оценки перспективности этих субстратов для выделения бактерий – агентов биопестицидов. Установлено, что штаммы, выделенные из кишечников сапрофагов и фитофагов, отличаются относительно штаммов, выделенных из их кормового субстрата большим антагонизмом к кишечным бактериям (Escherichia coli, Staphylococcus aureus). Штаммы, выделенные с растений, имеют отличительные особенности от штаммов, выделенных из фитофагов, большим антагонизмом к бактериям, ассоциированным с растениями (Leuconostoc mesenteroides, Micrococcus luteus). Коллекция кафедры биологии почв была пополнена штаммами-продуцентами БАВ.
5 1 января 2025 г.-31 декабря 2025 г. Изучение бактериальных и грибных сообществ торфяных почв (нативные и агроценозы), оценка их функциональной роли.
Результаты этапа: Проведено исследование микробной биомассы полных профилей эутрофных торфяников различного генезиса. В большинстве исследованных профилей в деятельном слое торфяников преобладала эукариотная биомасса, в инертном слое – прокариотная. Структура прокариотной биомассы в эутрофных торфяниках была однотипной по всему профилю: доминировали бактерии, на долю актиномицетного мицелия приходилось не более 15%. Выявлена достоверная зависимость прокариотной биомассы от ботанического состава торфов, слагающих профили. Её значения увеличивались от группы древесных к группе травяных торфов. В деятельном слое торфяников доминировал мицелий, составляя от 53 до 80%. В инертном слое грибная биомасса была представлена преимущественно спорами. Запасы биомассы спор грибов, бактерий и актиномицетного мицелия, рассчитанные на весь профиль, характеризуются величинами одного порядка, но запасы грибного мицелия могут быть разными. Активность дыхания была выявлена по всему профилю эутрофных торфяников. Весомым оказался отклик микробной биомассы на внесение глюкозы не только в деятельном, но и в инертном слое. Комплексное исследование микобиоты эутрофных торфяников показало, что запасы грибной биомассы в торфяниках различного генезиса и региона в один сезон одного года могут различаться на порядок. Культивируемые грибы в исследуемых торфяниках были представлены 52 видами из 32 родов, из них с высокой частотой встречаемости выявляли представителей Mortierella, Cladosporium, Penicillium и Trichoderma. Исследование актиномицетных комплексов эутрофных торфяников различного генезиса позволило обнаружить актиномицетный мицелий на всех глубинах их трёхметровых профилей. Однако исследуемые торфяники различались характером профильного распределения и показателями обилия актиномицетов. Выявлена достоверная зависимость содержания актиномицетного мицелия от ботанического состава и степени разложения торфов, слагающих профили исследуемых торфяников. Из исследуемых торфяников удалось выделить представителей 4 родов актиномицетов (Streptomyces, Micromonospora, Streptosporangium, Streptoverticillium). Подстилки не уступают эутрофно-торфяному горизонту по видовому разнообразию и превосходят по обилию мицелиальных прокариот и эукариот, что делает их значимым компонентом болотно-лесных экосистем эутрофного типа. В подстилках этих экосистем активно идут процессы деструкции органического детрита, так как следующий за подстилками эутрофно-торфяный горизонт представлен низинными торфами со средней и высокой степенью разложения. Подстилки заболоченных лесов являются перспективными природными локусами для выделения активных штаммов грибов и актиномицетов, обладающих способностью разлагать целлюлозу, лигнин и другие органические субстраты. Обнаружен значительный потенциал стрептомицетов, выделенных из зоны основной деструкции органического детрита эутрофных торфяных почв, в продукции антифунгальных веществ и целлюлаз. Роль бактерий в торфяниках особенно возрастает в нижней толще, где блокируется функционирование грибов – главных деструкторов органического вещества. Бактерии обнаруживали по всему профилю, их численность была высока и варьировала от 27 до 78 млрд. клеток/г сухого торфа с плавным уменьшением вниз по профилю. Изучение процессов азотфиксации, денитрификации и метаногенеза показало, что бактерии находятся в жизнеспособном состоянии и способны проявлять свою активность по всему профилю. Использование высокопроизводительного секвенирования фрагментов генов 16S рРНК для изучения таксономического состава прокариотного сообщества эутрофного болота позволило многократно увеличить учёт бактериального разнообразия. Показано, что прокариотные сообщества на разных глубинах исследуемого торфяника представлены преимущественно доменом Bacteria, на долю Archaea приходилось не более 10%. Домен Bacteria включал 28 филумов, из них 11 выявляли на всех глубинах профиля. Многочисленными были Pseudomonadota, Acidobacteriota и Bacteroidota. Домен Archaea был представлен 10 филумами, многочисленными среди них были Nitrososphaerota, Bathyarchaeota и Thermoplasmatota. Установлено, что таксономическая дифференциация прокариотных сообществ наиболее чётко проявляется при анализе деятельного и инертного слоёв профиля. В деятельном слое существенно (в 3–4 раза) преобладает доля филумов Acidobacteriota и Actinomycetota, в инертном – доля Bdellovibrionota (в 9 раз), Bacteroidota и Chloroflexota (в 3 раза). Из филума Pseudomonadota представители класса альфа (семейства Xanthobacteraceae) доминируют в деятельном слое, класса бета (семейств Comamonadaceae, Oxalobacteraceae, Methylophilaceae) ‒ в инертном слое. В архейном сообществе представители класса Nitrososphaerota превалируют в деятельном слое, Bathyarchaeota – в инертном слое. Проведён мониторинг биологической активности пойменных торфяных почв с учётом пространственного фактора и режима эксплуатации (осушения). Выявлено, что почвы нативной поймы (в пределах верхней метровой толщи) различались по обилию бактерий и спор грибов не более чем в 2 раза, по содержанию актиномицетного мицелия – в 3 раза, грибного мицелия в – 5 раз. Установлено, что почвы нативного и осушаемого участков правобережной поймы различались по микробному обилию не более чем в 2 раза. Для грибного мицелия эффект от осушения (увеличение его содержания) выявляли в верхней части профиля (горизонте ТЕ), тогда как для бактерий (одноклеточных и мицелиальных) он был смещен в нижнюю часть профиля (горизонт ТТ). Почва осушаемого участка поймы по микробному пулу в 2–4,5 раза превосходила почвы нативного участка поймы. Соотношение грибы/бактерии в почве осушаемого участка поймы было наибольшим и равнялось 6, в почвах нативного участка поймы этот показатель колебался от 1 до 4. Осушение поймы способствовало увеличению в почвах респираторной и нитрогеназной активности и приводило к снижению активности метаногенеза и денитрификации. Эффект от осушения поймы проявлялся в верхней 1,5 м толще и был связан с увеличением в микробной биомассе доли актиномицетов и грибов – микроорганизмов, способных осуществлять деструкцию торфа. В пойменных торфозёмах большую часть метаболически активного прокариотного сообщества составляют бактерии. Доля архей возрастает от 5–15% в почвах притеррасной и 15% в прирусловой до 20–25% в почвах центральной части поймы. В бактериальном домене значительную долю составляют филумы Acidobacteriota, Planctomycetota, Verrucomicrobiota, в домене Археи преобладают Thaumarchaeota и Crenarchaeota. Существенные изменения состава прокариотных сообществ наблюдаются в торфозёмах, используемых под пашню. В переуплотненной средней части их профиля (в том числе в образцах плужной подошвы) развитие получают представители Deltaproteobacteria, Planctomycetota, Acidobacteriota и Thaumarchaeota. Установлено, что освоение пойменных эутрофно-торфяных почв активизирует аэробное метанотрофное сообщество по всему профилю, Благоприятные условия для потребления метана в анаэробных условиях складываются в слабо осушенных и пирогенных торфяниках под лесной растительностью. Анаэробное окисление метана в исследуемых почвах лимитируется недостатком нитратов. Почвенные образцы, в которых выявлено присутствие анаэробных Methylomirabilis oxyfera и микроаэрофильных Methylocystis parvus, проявляют способность к потреблению метана в анаэробных условиях. Выявлено, что окультуренные эутрофно-торфяные пойменные почвы способны функционировать как окислительный фильтр для поступающего из нижележащей толщи метана, но поглощать метан из атмосферы способны только хорошо окультуренные старопахотные торфяные почвы и пирогенные почвы.
6 1 января 2026 г.-31 декабря 2026 г. Роль почвенного микробиома в образовании и поглощении парниковых газов
Результаты этапа: -
7 1 января 2027 г.-31 декабря 2027 г. Оценка биотехнологического потенциала микробных сообществ почв и сопряженных субстратов тропического региона
Результаты этапа: -

Прикрепленные к НИР результаты

Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".