ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ПсковГУ |
||
1. Способ получения ингибитора коллагеназ с антикоагулянтным действием из гепатопанкреаса камчатского краба, характеризующийся проведением гомогенизации сырья в 0.1 М ацетате аммония, содержащем 0.1-1 мМ ацетата кальция при рН 6.4-7.0, гомогенат центрифугируют, к супернатанту добавляют сульфат аммония до 60-70%-ного насыщения, полученный комплекс ферментов отделяют центрифугированием, растворяют последний в дистиллированной воде с добавлением 0.1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора с последующей очисткой, концентрированием и обессоливанием ферментов на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа и промывкой супернатанта, содержащего ингибитор коллагеназы, дистиллированной водой с последующим прогреванием до 60-100 0С, отделением осадка центрифугированием, полученный суммарный препарат ингибитора коллагеназы подвергают дополнительному растворению в 0.1 М ацетата аммония с рН 6.0-6.4, отделяют осадок центрифугированием и добавляют к супернатанту сульфат аммония до 35-45%-ного насыщения, после отделения осадка последний растворяют в 0.01 М трис-буфере с рН 7.0-8.0, раствор прогревают при 70-90 0С, подвергают центрифугтрованию, а полученную сульфат-пасту растворяют в 0.05 М трис-буфере с рН 8.0 с добавлением 0.5 М NaCl и фракционируют гель-фильтрацией на Сефадекс G-100 с последующим концентрированием активных фракций ультрафильтрацией на мембране с размером пор 30-50 кДа, супернатант, содержащий целевой продукт, промывают и лиофильно высушивают. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что прогревание раствора пр и температуре 70-90 0С ведут в течепние 25-40 мин.