ИСТИНА

Диссертация посвящена исследованию способов биотехнологического получения секретируемой микромицетом Aspergillus ochraceus BKM-F4104D протеазы-активатора протеина С плазмы крови. В рамках работы показана возможность многократного использования иммобилизированного в полимерных гранулах продуцента для получения целевого фермента, выявлены увеличенная интенсивность его образования при иммобилизации, а также повышенная стабильность самого продуцента по сравнению с традиционным глубинным культивированием. Разработан трехстадийный способ хроматографической очистки целевой протеазы из культуральной жидкости продуцента. Установлена и проанализирована последовательность гена исследуемой протеазы, показана ее принадлежность к группе протеиназы-К-подобных субтилизиновых протеаз. Установленная последовательность депонирована в международной базе данных NCBI GenBank под номером MW183406. В результате бактериальной экспрессии и последующей хроматографической очистки была получена функционально активная форма фермента, идентичная образуемой микромицетом A. ochraceus ВКМ-F4104D, изучены особенности ее фолдинга и созревания.