Адсорбция лизоцима из водных растворов на различных гидрофобных поверхностях: графит, активированный уголь, полиэтилен, октандипломная работа (Специалист)
Аннотация:Развитие биотехнологий и применение наноразмерных систем в биохимии и медицине повысили интерес к исследованию процессов, происходящих на границе раздела фаз вода/гидрофобная поверхность с участием белковых молекул. Особую сложность для экспериментального исследования представляет адсорбция биологически активных макромолекул из водной фазы на твёрдых гидрофобных материалах.
В данной работе использовали меченный тритием лизоцим, с помощью которого определили кинетику адсорбции лизоцима на графите (прессованная фольга), активированном угле (гранулы) и полиэтилене (пленка), межфазной границе вода/октан, а также изотермы адсорбции белка на этих объектах в диапазоне концентраций от 0,003 до 2 г/л. Концентрацию белка в растворе и количество адсорбировавшегося белка определяли с помощью жидкостного сцинтилляционного счета, распределение белка на поверхности пленки и фольги контролировали с помощью авторадиографии.
Оказалось, что адсорбционное равновесие для исследуемых материалов достигалось с разной скоростью: для полиэтилена и активированного угля за 2 и 3 суток, для графитовой фольги - более 10 суток. Адсорбция лизоцима на исследованных материалах оказалась необратимой, десорбция в соляный фосфатный буфер была незначительная. Некоторая десорбция лизоцима происходила в растворах неионогенного ПАВ Бридж-35. Удаление лизоцима с исследуемых материалов происходило только при длительном выдерживании их в 12 н HCl и 6 н NaOH, причем десорбция в кислых и щелочных растворах, вероятно, сопровождалась гидролизом белка. Структурную организацию адсорбционных слоев лизоцима на пленке полиэтилена исследовали с помощью тритиевого зонда в комбинации с методом авторадиографии. Было показано, что молекулы лизоцима более плотно упакованы в адсорбционном слое, образованном на графитовой фольге, чем на полиэтилене.
Проведено сопоставление кинетики процесса и изотерм адсорбции лизоцима на твердых гидрофобных материалах с данными, полученными для межфазной границы водный раствор/октан. Выдвинуто предположение, что лимитирующей стадией адсорбции белка на графитовой фольге является изменение свойств поверхности, приводящие к увеличению смачиваемости поверхности раствором.