|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ПсковГУ |
||
Гиперсоленые водоемы широко распространены на планете и относятся к числу наиболее экстремальных местообитаний Земли. Современное Аральское море является бессточным гиперсоленым озером. На сегодняшний день общая минерализация воды Аральского моря составляет 240‰, содержание хлоридов – 117.76 г/л (1). В прошлом Аральское море входило в число крупнейших континентальных водоемов планеты. Однако, начавшаяся в середине прошлого века антропогенная регрессия, привела к катастрофическим последствиям, в результате чего это местообитание стало непригодным для существования многих организмов. В настоящее время основными обитателями Аральского моря являются галофильные рачки Artemia parthenogenetica (3) и прокариоты, главным образом галоархеи. Несмотря на уникальность Аральского моря и важнейшее значение для региона, сведения о микробном разнообразии и экологической роли микроорганизмов, в нем обитающих, весьма ограничены. Целью нашей работы было изучение новых штаммов галоархей, выделенных из Аральского моря. Из образцов воды Аральского моря на минеральной среде DBCM2 (2), по составу имитирующей природную аральскую воду с содержанием NaCl 18-30% с хитином различного происхождения в качестве энергетического субстрата, были получены аэробные накопительные культуры. При посеве накопительных культур на агаризованную твердую среду с хитином и пируватом был получен рост розовых колоний, предположительно галофильных архей, которые затем были выделены в чистую культуру. Морфологически новые изоляты представляли собой плеоморфные клетки – кокки и клетки неправильной формы. Анализ генов 16S рРНК новых изолятов показал, что они принадлежали к роду Haloferax. Новые штаммы Haloferax не были способны к росту на кристаллическом хитине. Для дальнейшей характеристики был выбран штамм 8AS, который, вероятно, может быть описан как новый вид Haloferax. Для изучения физиолого-биохимических свойств нового штамма проверяли различные физиологические параметры роста: субстраты, соленость, температуру, pH. Для определения спектра используемых субстратов использовали фруктозу, глюкозу, сахарозу, пируват, глицерин, желатин, крахмал, Na-альгинат, нефть, ундекан, бензоат. Проверку роста выделенных штаммов на различной концентрации соли (15%, 18%, 24%, 27%, 30%) проводили на сахарозе. Рост галоархей оценивали подсчётом клеток с помощью иммерсионного микроскопа Nikon Е100. Все эксперименты проводили в трёх повторностях. Новый штамм оказался способен использовать в качестве источника органики сахарозу, глюкозу, фруктозу, ундекан, бензоат, нефть. Проанализированный график солёности показал, что изучаемый штамм растёт при всех избранных концентрациях, но наилучший рост наблюдается при 24% соли. Галоархеи рода Haloferax представляют значительный интерес для биотехнологии, благодаря своей способности продуцировать каротиноиды и ферменты, работающие в экстремальных условиях. Таким образом, анализ нового штамма Haloferax не только расширит наши представления о метаболическом разнообразии микроорганизмов Аральского моря, но также может иметь и прикладное значение.