ИСТИНА

Обоснование. У пациенток с повторными неудачами имплантации основной акцент делается на нарушение рецептивности эндометрия, однако клеточные и рецепторные особенности эндометриальных мезенхимальных стромальных клеток в этой группе остаются практически не изученными, особенно на уровне пролиферативной активности и экспрессии эстрогеновых рецепторов. Настоящее исследование призвано охарактеризовать пролиферативную активность и экспрессию эстрогеновых рецепторов в МСК эндометрия у пациенток данной группы для выявления нового звена патогенеза бесплодия и потенциальных терапевтических мишеней. Цель исследования. Изучить функциональные свойства мезенхимальных стромальных клеток (МСК) эндометрия, в частности их пролиферативную активность и экспрессию эстрогеновых рецепторов, у пациенток с повторными неудачами имплантации эуплоидных эмбрионов. Методы. В пилотное исследование включены 5 пациенток в возрасте 25–40 лет. Основную группу составили 4 пациентки с повторными неудачами имплантации. В качестве положительного контроля использован образец эндометрия суррогатной матери с 6 своевременными родами в анамнезе. МСК выделяли из биоптатов эндометрия, полученных путем аспирационной биопсии в первую фазу менструального цикла. Экспрессию гена ESR1 определяли методом ПЦР в реальном времени, белок эстрогенового рецептора альфа (ERα) — иммуноцитохимически с флуоресцентными антителами. Пролиферативную активность МСК оценивали в системе анализа живых клеток IncuCyte в контрольной среде и при добавлении 17β-эстрадиола 0,1 нM. Результаты. Содержание мРНК эстрогенового рецептора ESR1 в культивируемых МСК эндометрия оказалось приблизительно в 10 раз выше по сравнению с МСК жировой ткани. Иммуноцитохимическое исследование выявило специфическую экспрессию ядерных ERα во всех образцах, при этом у пациенток с бесплодием неясного генеза количество рецепторов было снижено относительно контроля, а наименьший уровень экспрессии ERα обнаружен при трубно-перитонеальном бесплодии. МСК эндометрия пациенток с повторными неудачами имплантации продемонстрировали достоверно более низкую скорость пролиферации по сравнению с МСК суррогатной матери. Наименьшая пролиферативная способность МСК эндометрия была обнаружена у пациенток с бесплодием неясного генеза. Добавление 17β-эстрадиола вызвало статистически значимое увеличение скорости пролиферации МСК эндометрия как у суррогатной матери, так и у пациенток с бесплодием неясного генеза. У пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием эстрадиол в концентрации 0,1 нМ не стимулировал пролиферацию МСК эндометрия. Заключение. Впервые продемонстрировано снижение пролиферативной активности и экспрессии эстрогеновых рецепторов (ERα) в МСК эндометрия у пациенток с повторными неудачами имплантации. Полученные данные свидетельствуют о том, что МСК пациенток с бесплодием неясного генеза сохраняют чувствительность к эстрогену, несмотря на снижение количества рецепторов. Результаты исследования расширяют фундаментальные представления о функциональных особенностях эндометриальных МСК при повторных неудачах имплантации.