ИСТИНА

Введение Т-клетки человека являются одними из самых подвижных клеток в организме с самой большой линейной скоростью движения in vivo [1], и способностью переключаться между всеми возможными типами движения [3]. В активной и направленной миграции Т-клеток, проходящей по мезенхимальному типу, участвуют молекулы интегринов [2], однако их комбинации, экспрессируемые в ответ на разные стимулы, мало изучены. В данной работе для стимуляции были предложены сыворотка крови пациентов, больных атеросклерозом, и среда, кондиционированная эксплантами атеросклеротической бляшки (АСБ) - как при- мер специфической (проатерогенной) стимуляции Т-клеток, а также PMA+йономицин – для их неспецифической активации. Цель исследования Разработать модели активации Т-клеток периферической крови и выявить паттерны представленностиинтегринов при различных стимуляциях. Материалы и методы CD4+ и CD8+ Т-клетки человека были отсортированы на приборе FACSAria SORP. Активация осуществлялась при высаживании Т-клеток на подложку, содержащую: фиб- ронектин+anti-CD3;фибронектин+anti-CD3+сывороткакрови;фибронектин+anti-CD3+конди среда.Неспецифическая стимуляция осуществлялась на подложке фибронектин+anti-CD3 путем инкубации клеток с PMA+йономицином в течение 2 часов. Анализ экспрессии ге- нов интеринов (ITGB1, ITGB7, ITGA1, ITGA4, ITGA5 и ITGAE ) проводился методом ПЦР в реальном времени. Оценка миграторного потенциала активированных Т-клеток осуществлялась по анализу треков миграции в программе FIJI. Результаты Миграторный потенциал Т-клеток повышался в присутствии сыворотки больных ате- росклерозоми среды,кондиционированной АСБ,чтосвидетельствуетобих успешной про- атерогенной активации. Для CD4+ Т-клеток активация сывороткой крови больных ате- росклерозом приводила к повышению экспрессии мРНК ITGB1, ITGB7, ITGA1, ITGA4 ; активация кондиционированной средой – к повышению экспрессии мРНК ITGB1. При активации PMA+йономицин достоверных изменений не было. Для CD8+ Т-клеток оба варианта проатерогенной активации приводила к повышению экспрессии мРНК ITGB1, ITGB7, ITGA1. Активация PMA+йономицин приводила к повышению экспрессии мРНК ITGA1 и ITGB 7 в CD8+ Т-клетках. Заключение Показана эффективная активация Т-клеток при проатерогенной стимуляции и установлен дифференциальный профиль экспрессии мРНК интегринов, возникающий при стимуляции CD4+ и CD8+ Т-клеток. Работа поддержана грантом №25-25-00074. Источники и литература 1) Miller, M. J. (2002). Two-Photon Imaging of Lymphocyte Motility and Antigen Response in Intact Lymph Node. Science, 296(5574), 1869–1873. doi:10.1126/science.1070051 2) Shulman Z. и др. Lymphocyte Crawling and Transendothelial Migration Require Chemokine Triggering of High-Affinity LFA-1 Integrin // Immunity. 2009. Т. 30. No 3. С. 384–396. 3) Von Andrian U. H., Mackay C. R. T-Cell Function and Migration — Two Sides of the Same Coin // N Engl J Med. 2000. Т. 343. № 14. С. 1020–1034.