ИСТИНА

Основная догма молекулярной биологии постулировала, что в клетках эукариот один ген кодирует один белок, но развитие методов анализа генома, транскриптома и протеома позволило расширить границы кодирующего и регуляторного потенциала генома. Определение функциональных малых ОРС, состоящих менее чем из 100 кодонов, представляет собой серьезную научную проблему. Анализ распределения рибосом по РНК эукариотической клетки выявил накопление транслирующих рибосом в областях прежде считавшихся некодирующими, например, 5’-нетранслируемые области (5’-НТО) многих мРНК накапливают рибосомы, т.е. могут содержать вышележащие ОРС. Вышележащие ОРС могут регулировать трансляцию in cis, а также кодировать небольшие функциональные белки (микробелки). Мы использовали библиотеку лентивирусных частиц для подавления функционирования, выбранных на основании анализа данных рибосомного профилирования, 977 малых рамок считывания при помощи CRISPR/Cas9 системы геномного редактирования для поиска областей, участвующих в поддержании пролиферации клеток. Исследование механизмов функционирования некоторых, выявленных в ходе скрининга, мишеней позволит определить их роль в жизнедеятельности клетки.