![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ПсковГУ |
||
Введение. Губки обладают выраженной способностью к регенерации. Для еë моделирования применяют реагрегацию диссоциированных клеток. Было показано, что у большинства исследованных видов губок клетки реагрегируют видоспецифично. На молекулярном уровне это обусловлено внеклеточными комплексами «факторов агрегации» (ФА). По химической природе это протеогликаны, обладающие линейной или розетковидной структурой за счёт наличия особого Wreath-домена. Было продемонстрировано, что некоторые губки способны к аллогенному распознаванию («своё-чужое»). Работы Fernandez-Busquets и соавторов указывают на ведущую роль ФА в данном процессе, так как 1) для ФА характерна высокая степень полиморфизма; 2) РНК ФА и сам белок накапливаются в области контакта трансплантатов. Тем не менее, точный механизм регуляции распознавания не установлен. Методы. С помощью транскриптомных данных, полученных для обыкновенной губки Белого моря Halisarca dujardinii, были выбраны три гена, кодирующих белки с характерной для ФА структурой. Методом секвенирования по Сэнгеру были валидированы последовательности, полученные при РНК-секвенировании. Были проведены эксперименты по трансплантации, на различных временных точках из аллогенных и аутологичных пар была выделена РНК. Анализ экспрессии генов проводили при помощи количественной ПЦР, сопряжённой с обратной транскрипцией. Результаты. Мы наблюдали начало приживления аутологичных трансплантатов через 12 часов инкубации. Спустя сутки аутологичные образцы тканей полностью срастались, а аллогенные оставались несросшимися. Было показано, что экспрессия двух из трёх генов-кандидатов повышается через 12 часов после начала эксперимента как в аллогенных, так и в аутологичных парах. Также, повышение экспрессии этих генов происходит в ответ на прокалывание ткани, однако это не связано с процессом регенерации. По результатам статистического анализа, в аутологичных парах экспрессия трёх генов-кандидатов в среднем достоверно выше, чем в аллогенных парах. Тем не менее, у ряда особей экспрессия отдельных генов-кандидатов в аллогенных парах превышала уровень экспрессии в аутологичных парах. Выводы. По нашим сведениям, это первые данные о системе гистосовместимости у H. dujardinii. Была продемонстрирована корреляция приживления аутологичных трансплантатов и повышения уровня экспрессии трёх генов, кодирующих белки с Wreath-доменом.