ИСТИНА

Более, чем в 50% случаев противоопухолевая терапия с использованием стандартных препаратов на основе платины оказывается не эффективной вследствие развития химиорезистентности, не говоря уже о выраженных побочных, токсических эффектах для организма. Данное исследование посвящено разработке подхода, нацеленного на оптимизацию химиотерапии с использованием малых доз препарата на фоне ингибирования экспрессии генов, непосредственно ответственных за развитие устойчивости опухоли к оксалиплатину, с помощью малых интерферирующих РНК (иРНК). Экспрессионные характеристики клеток рака толстой кишки при действии малых доз оксалиплатина исследовалась с помощью ПЦР в реальном времени по специально разработанному алгоритму. В результате анализа профиля экспрессии панели генов, участвующих в ответе на оксалиплатин, в том числе, в ингибировании апоптоза, были определены потенциальные гены– 53 мишени, включая семейство каспазных ингибиторов, экспрессия которых подавлялась с использованием малых интерферирующих РНК. Случайные по последовательности нуклеотидов иРНК были использованы в качестве отрицательного контроля. Анализ апототической гибели клеток оценивался флюоресцентным микроскопированием с использованием красителей пропидия иодида и Hoechst 33258. В результате проведенного исследования выявлены гены, активация которых непосредственно обусловлена воздействием химиопрепарата. Комплексное одновременное ингибирование нескольких генов–мишеней приводило к 7 – кратному увеличению чувствительности раковых клеток к оксалиплатину на фоне малых доз препарата. Цитотоксичность в результате использования случайно подобранной иРНК не отличалась от эффекта малых доз без использования иРНК. Найдено, что подавление одиночных мишеней не приводит к значительным показателям снижения химиорезистентности. Противоопухолевая эффективность иРНК при данном подходе достигается выключением нескольких ингибиторов каспаз 3 и 9, ответственных за выживаемость раковой клетки.