ИСТИНА

Введение. Опухоль-ассоциированный антиген (ОАА) HER2 представлен на поверхности солидных опухолей самых различных локализаций (молочная железа, яичники, легкие, костная ткань и т.д.) Присутствует данный антиген также на поверхности около 3% злокачественных меланом. Таким образом, HER2-специфические CAR-лимфоциты могут оказаться эффективны для терапии подобных меланом, что было протестировано нами в моделях HER2+ меланом in vitro. Материалы и методы. Нами был создан ряд конструкций CAR к ОАА HER2 с разными рецепторными доменами 1). Генноинженерный одноцепочечный антигенсвязывающий участок моноклональных HER2-специфических антител. 2). Комплекс таргетного препарата трастузумаба с CAR на основе низкоаффинного рецептора иммуноглобулинов G CD16. Были использованы сигнальные участки CAR третьего поколения (OX40, CD28, CD3ζ). Конструкции CAR были клонированы в векторы для временной и постоянной экспрессии в клетках млекопитающих (pMax-Cloning (Lonza), MIGR, Lenti-PGK-Blast (Addgene)). Модификацию человеческих активированных лимфоцитов осуществляли либо путем спинокуляции, либо нуклеофекции. Цитотоксическую активность определяли в МТТ-тесте по лизису HER2+ линий меланом с низкой (MTP) и высокой (Mel-IL) экспрессией. Экспрессия HER2 была показана путем проточной цитометрии со специфическими антителами. Результаты и обсуждение. В результате исследования была показана значительная цитотоксическая активность HER2-специфических CAR-эффекторов в отношении обоих линий меланомы (40-70%). Аналогичные данные были получены в доклиническом исследовании Forsberg E.M.V. et al. Заключение. Таким образом, HER2-специфические CAR-лимфоциты потенциально могут использоваться для лечения HER2-позитивной злокачественной меланомы.