ИСТИНА

Нуклеотиды, олигонуклеотиды, ДНК, РНК являются маркерами многочисленных патологических состояний. Количественный уровень и наличие мутаций циркулирующей опухолевой ДНК (cDNA), а также РНК или микроРНК (miRNA) может выступать в роли диагностических биомаркеров при разлиных видах онкологических заболеваний, как прогностические маркеры для исследования ответа на терапию, как маркеры прогрессирования заболевания. Изменение протяженности ДНК (фрагментация ДНК) является одним из маркеров программируемой гибели клеток (апоптоза). Анализ модифицированных гетероциклических оснований (например, профилей метилирования) перспективен для эпигенетических исследований, для анализа точенчных мутаций как биомаркеров. Активно развивающиеся технологии геномного редактирования (gene editing) перспективны для практической медицины спозиций корректировки генома. В связи с этим необходимы новые подходы и новые высокочувствительные аналитические методы регистрации ДНК и нуклеотидов, нуклеозидов и гетероциклических оснований. Методы анализа гетероциклических оснований, нуклеотидов, ДНК и РНК (direct electrochemistry of DNA bases) основыны на способности пуринов (при более оотрицательных значениях потенциалов) и пиримидинов (при высоких положительных значениях потенциалов) окисляться по рН-зависимому механизму. Количественный анализ нуклеотидов проведен с помощью печатных электродов, модифицированных дисперсиями многостенных углеродных нанотрубок (УНТ), солюбилизированных катионными полимерами и диблоксополимерами. Для иммобилизации полианионной структуры ДНК на рабочем электроде "закрепление" биомолекулы на поверхности графитовых электродов, полученных методом трафаретной печати (screen-printed electrodes, SPE) было реализовано с помощью стабильных дисперсий УНТ на основе катионных полимеров и диблоксополимеров. Диапазон определяемых концентраций dsDNA составил 5 - 500 мкг/мл (по пику окисления G при Е = +0,58 +/- 0,02 В), 0,5 - 50 мкг/мл (пик окисления А при Е = +0,86 +/- 0,02 В), чувствительность 1Е-07 А/мкг. Анализ однонуклеотидных замен проводили методм дифференциально импульсной вольтамперометрии. В качестве коротких фрагментов ДНК использовались синтетические олигонуклеотиды с последовательностью, соответствующей фрагменту 21 экзона гена рецептора эпидермального фактора роста EGFR. (O-22, c. 64)